人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A（MMP-2/Gelatinase A）ELISA試劑盒

產品型號：MMP-2/Gelatinase A

廠商性質：生產廠家

所在地：上海市

更新時間：2015-12-23

產品簡介：

人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A（MMP-2/Gelatinase A）ELISA試劑盒建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋數。

產品特性Product characteristics

品牌	R&D/美國

【名稱】：人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒

【規格】：48T/96T
【方法】：酶聯免疫法/酶免法(ELISA)
【性狀】：液態
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
【用途】：科研實驗
【貯存】：貯存于2℃-8℃.如有需要，我們將竭城為顧客提供售前，售中，售后的*服務!
人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存
1）.細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒操作步驟
1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。
2）分組：取出96孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。
3）標準品的稀釋：準備小試管6 只，依次編好號碼，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻；然后在該試管中取100ul，棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
4）加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去，如此重復5 次，拍干。
7）加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）。
8）溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標板5次，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。
11）終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘，加入50ul終止液。
12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。
注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內，以免影響準確性。
數據計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，即為樣品的實際濃度。
人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒注意事項
1）實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2）加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響實驗的準確性以及重復性。
3）孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4）反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
5）建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋數。
6）建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒退換貨政策
若發生退換貨需求，請先致電客服人員。符合退換貨政策的，我司將與您簽訂退換貨協議，并根據協議進行退換貨。
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1、客戶在訂購產品時請仔細確認后再行訂購，由客戶選型失誤而造成的退貨需求，我方不承擔任何責任。產品大多性質較為特殊，存儲方式復雜，請用戶按照貯存條件說明妥善保存。
2、已超過受理期限的產品；
3、產品無標簽，或標簽已無法識別是否屬于我司試劑的產品；
4、密封產品原包裝打開，一次性封貼或膠條破損（質量問題除外）；
5、產品已使用（質量問題除外）；
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